慢病毒载体服务
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种,具有逆转录病毒的基本结构和特性:能整合入宿主细胞基因组,长期表达;不仅可以感染分裂细胞,更重要的是还能感染非分裂的细胞,可用于基因治疗、蛋白表达、药物筛选、基因功能验证等,是现代分子生物学研究的一个好工具。
服务内容
定制膜蛋白基因:膜蛋白决定了假病毒的易感靶细胞,由客户提供信息。
定制导入目标基因:客户需求决定。
定制报告基因:客户需求决定。
根据客户提供的目的基因相关信息(模板、序列、基因序列号等),构建含有外源基因或序列的重组载体;对于测序正确的重组质粒,提取和纯化高质量(不含内毒素)的重组质粒;使用高效重组载体和慢病毒包装质粒共转染293T细胞,进行病毒包装并收集上清液;用病毒感染靶细胞。
用高质量的病毒感染靶细胞,通过实时定量PCR或者Westen blot检测目的基因表达,也可以进一步进行稳定细胞株的筛选用于长期的功能学研究。
1. 根据目的基因相关信息(序列、基因序列号等)获取目的基因;
2. 选择符合实验要求的载体;
3. 将目的基因构建到慢病毒载体获得含有目的基因的重组载体;
4. 对于测序正确的重组质粒,提取和纯化高质量(不含内毒素)的重组质粒;
5. 使用高效重组载体和慢病毒包装质粒共转染293T 细胞,进行假病毒包装并收集上清液;
6. 使用假病毒病毒感染靶细胞,测定病毒滴度。
应用实例
基因功能研究(体内/体外),药物研发、细胞建系、基因治疗、转基因动物模型等
应用领域
慢病毒载体能够产生表达目的基因的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达目的基因,实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定的基因表达的功能性沉默,为在原代的人和动物细胞组织中快速而高效地研究基因功能,以及产生特定基因表达降低的动物提供了可能性。
服务周期
8~10周。
客户须知(对材料的要求、注意事项)
目前我们能够为客户提供从载体构建到慢病毒包装纯化和检测的一站式服务;同时公司还在高效慢病毒生产技术的基础上建立并完善了慢病毒载体制备转基因动物的实验技术。公司还承接慢病毒操作相关实验。