产品内容

SuperFast DNA polymerase                       5U/ul

10×SuperFast Buffer                                         

50mM MgCl₂                                             

特性

快速高效率扩增

SuperFast DNA polymerase具有卓越的扩增效率和反应性能，能在短时间内对GC含量高的模板进行高效扩增。延伸速度为4-8kbp/min 是Taq DNA polymerase 4-8 倍。

产品说明

SuperFast DNA polymerase是BiovisuaLab公司通过基因改造技术自主开发的一种具有极高反应性能和扩增效率的DNA聚合酶，具有5’-3’ DNA 聚合酶活性和5’-3’外切酶活性，无3’-5’外切酶活性。延伸速度为4-8kb/min。本酶扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A”碱基，可以直接克隆于T载体中。

用途

主要用于PCR法扩增，特别适用于快速PCR扩增。

应用指导

使用方法（用户需自备：dNTP Mix、dd H₂0、DNA模板、引物）

使用前请先将试剂混匀并离心，再配制反应体系。酶制品含有50%甘油，使用时需慢慢吸取。

50ul反应体系的配制：

10×SuperFast Buffer                           5ul

dNTPs Mix (10mM each)                    1ul

MgCl₂ (50mM)                                   1.5ul

模板                                                1-100ng（质粒）

100-1000ng（基因组）

正向引物(10uM)                             1~2.5ul

反向引物(10uM)                             1~2.5ul

SuperFast DNA polymerase              5U

ddH2O补充至总反应体积50ul。

反应条件：

94℃                                                1min

94℃                                                20sec.

55-65℃                                           30sec.

72℃                                                4-8kb/min

建议35~40循环

注意

SuperFast DNA polymerase延伸速度为4-8Kb/min，延伸时间过长有时会产生拖尾效应， 可缩短延伸反应时间。

克隆策略

SuperFast DNA polymerase扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A”碱基，可以直接克隆于T载体中。

活性定义

75℃，30min, 摄入10nmol的全核苷酸使其成为酸性不溶物的活性为1U。

保存

-20℃恒温保存1年

运输

2-8℃